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Cat. Number	1050001
Chemical Name	1050001 金简达Gentle F30 原代皮肤细胞核酸转染试剂
Qty 1	3.6ml
References	产品概述基于多肽的核酸递送是一种最新的递送技术，能够显著提升各类细胞，包括原代细胞、难转细胞系的核酸转染。GentleFectTM 技术基于高通量多肽筛选平台，精准识别具有相分离潜力的内源多肽序列，开发了针对原代皮肤细胞的 Gentle F30 原代皮肤细胞核酸转染试剂。多肽通过液 - 液相分离自组装形成纳米级微滴，借助细胞膜胞饮作用实现高效内化，在维持细胞活性前提下显著提升各类物种原代皮肤细胞的核酸递送效率。产品特性同时适用于各类核酸分子转染，包括 DNA、mRNA、siRNA、circRNA、Crispr 等；预混合转染液和转染缓冲液，仅需往试剂中加入核酸，即可一步完成转染配置。产品规格货号名称包装 1050001 Gentle F30 原代皮肤细胞核酸转染试剂 3.6 ml 保存条件短期 4℃保存；长期保存于 - 20℃。产品组分 Gentle F30 原代皮肤细胞核酸转染试剂；已验证的阳性对照（GFP mRNA）。实验前准待转染的原代皮肤细胞，细胞汇合率达到 70-80%，确保细胞活率 > 90%，无菌无酶 EP 管。将完全培养基、Opti-MEM 培养液、胰酶、核酸转染试剂恢复至室温，核酸保持低温。如果核酸为粉末状态，请提前用无核酶水溶解，此过程在超净台操作。实验步骤转染体系常见问题及解答转染试剂用量怎么确定？原代皮肤细胞为贴壁细胞，建议按照表 1、表 2 推荐的转染试剂用量进行转染或根据细胞量来等比增加 / 减少转染试剂的用量。如何提高转染效率？转染前应确保细胞处于良好的生长状态，建议细胞活率大于 90%；适当增加转染试剂和核酸的用量；（用量范围可在推荐用量的 1-2 倍）适当延长转染时间，孵育时间长短影响阳性率和细胞活率，根据细胞特性可尝试更短或更长孵育时间。哪些实验操作会影响转染效率？细胞转染孵育时请勿使用含 FBS 的培养基，FBS 会严重影响细胞转染效果； Gentle F30 转染试剂不建议剧烈涡旋，推荐使用移液器温和反复吹打混匀。内置阳性对照品怎么使用？设置阳性对照时，GFP mRNA 根据上述表格中的 mRNA 使用量进行实验即可。原代皮肤细胞操作要点原代皮肤细胞无需提前铺板，可大大简化实验步骤；经大量实验发现，制备的细胞悬液在 EP 管中与转染混合液孵育可使转染效率最大化。实验中离心可能出现的问题本文中出现的离心程序设置均为室温，300g，5 分钟；在转染结束时，EP 管离心后没有看到细胞沉淀是正常现象，这是细胞量较少导致的；在转染结束后，可加入 1mL 完全培养基轻吹混匀，终止转染的同时可去除转染试剂对细胞离心的影响。（转染试剂轻微粘稠是属于正常现象）相关链接 1050001 F30 原代皮肤细胞核酸转染试剂 1020001 S30 原代干细胞核酸转染试剂 1040001 NK30 原代 NK 细胞核酸转染试剂 1000001 A30 全能难转细胞核酸转染试剂 1010001 AP30 全能原代细胞核酸转染试剂 1030001 T30原代T细胞核酸转染试剂本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来，一直致力于为客户提供试剂，仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地，专注于体外诊断蛋白，靶标蛋白，工业用酶和细胞因子的生产和定制，按照GMP标准，为工业客户提供大包装蛋白原料。更多产品请联系惠诚生物！官网：www.e-biochem.com 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510
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