基于多肽的核酸递送是一种最新的递送技术,能够显著提升各类细胞,包括原代细胞、难转细胞系的核酸转染 [1][2]。GentleFectTM 技术基于高通量多肽筛选平台,精准识别具有相分离潜力的内源多肽序列,开发了针对原代 NK 细胞的 Gentle NK30 原代 NK 细胞核酸转染试剂。多肽通过液 - 液相分离自组装形成纳米级微滴,借助细胞膜胞饮作用实现高效内化,在维持细胞活性前提下显著提升各类物种原代 NK 细胞的核酸递送效率。
货号 名称 包装
1040001 Gentle NK30 原代 NK 细胞核酸转染试剂 3.6 ml
分选后激活的 2-8 天原代 NK 细胞,确保细胞活率 > 90%,无菌无酶 EP 管。
将完全培养基、Opti-MEM 培养液、胰酶、核酸转染试剂恢复至室温,核酸保持低温。
如果核酸为粉末状态,请提前用无核酶水溶解,此过程在超净台操作。


常见问题及解答
转染试剂用量怎么确定?
原代 NK 细胞为悬浮细胞,本试剂可以深度覆盖转染更多的 NK 细胞数量,如 96 孔板转染,可以实现从 1×10⁴到 2×10⁵细胞数范围的高效低毒转染。建议按照表 1、表 2 推荐的转染试剂用量进行转染或根据细胞量来等比增加 / 减少转染试剂的用量,最低可以转染 5×10³ 个细胞。
如何提高转染效率?
哪些实验操作会影响转染效率?
内置阳性对照品怎么使用?
设置阳性对照时,GFP mRNA 根据上述表格中的 mRNA 使用量进行实验即可。
实验中离心可能出现的问题
本文中出现的离心程序设置均为室温,300g,5 分钟;
在转染结束时,EP 管离心后没有看到细胞沉淀是正常现象,这是细胞量较少导致的;
在转染结束后,可加入 1mL 完全培养基轻吹混匀,终止转染的同时可去除转染试剂对细胞离心的影响。(转染试剂轻微粘稠是属于正常现象)
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