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| Cat. Number | 1030001 |
| Chemical Name | 1030001 金简达Gentle T30原代T细胞核酸转染试剂 |
| Qty 1 |
3.6ml |
| References | 产品概述 基于多肽的核酸递送是一种最新的递送技术，能够显著提升各类细胞，包括原代细胞、难转细胞系的核酸转染。GentleFectTM 技术基于高通量多肽筛选平台，精准识别具有相分离潜力的内源多肽序列，开发了针对常见原代 T 细胞的 Gentle T30 原代 T 细胞核酸转染试剂。多肽通过液-液相分离自组装形成纳米级微滴，借助细胞膜胞饮作用实现高效内化，在维持细胞活性前提下显著提升各类物种原代 T 细胞的核酸递送效率。 产品特性 同时适用于各类核酸分子转染，包括 mRNA, siRNA, circRNA, Crispr 等；预混合转染液和转染缓冲液，仅需往试剂中加入核酸，即可一步完成转染配置。 产品规格 货号 名称 包装 1030001 Gentle T30 原代 T 细胞核酸转染试剂 3.6 ml 保存条件 短期 4℃保存，长期保存于-20℃。 产品组分 Gentle T30 原代 T 细胞核酸转染试剂 已验证的阳性对照（GFP mRNA） 实验前准备 分选后激活的 2-8 天原代 T 细胞，确保细胞活率＞90%，无菌无酶 EP 管。将完全培养基、Opti-MEM 培养液、胰酶、核酸转染试剂恢复至室温，核酸保持低温。如果核酸为粉末状态，请提前用无核酶水溶解，此过程在超净台操作。 实验步骤图解
转染体系
常见问题及解答 原代 T 细胞可以转染质粒 DNA 吗？ 不可以，原代 T 细胞因自身独特的免疫特性，其细胞内的 cGAS-STING 信号通路对外源双链 DNA 较为敏感，不仅引发细胞周期阻滞，还会通过内源性凋亡途径导致细胞死亡，常规转染条件下，其细胞活率和阳性率会显 著降低。 转染试剂用量怎么确定？ 原代 T 细胞为悬浮细胞，本试剂可以深度覆盖转染更多的 T 细胞数量，如 96 孔板转染，可以实现从 1x104 到2x105细胞数范围的高效低毒转染。建议按照表 1、表 2 推荐的转染试剂用量进行转染或根据细胞量来等比增加/减少转染试剂的用量，最低可以转染 5x103个细胞。 如何提高转染效率？ ① 转染前应确保细胞处于良好的生长状态，建议细胞活率大于 90%; ② 适当增加转染试剂和核酸的用量。 ③ 适当延长转染时间，孵育时间长短影响阳性率和细胞活率，根据细胞特性可尝试更短或更长孵育时间。 哪些实验操作会影响转染效率？ ① 细胞转染孵育时请勿使用含 FBS 的培养基，FBS 会严重影响细胞转染效果； ② Gentle T30 转染试剂不建议剧烈涡旋，推荐使用移液器温和反复吹打混匀。 内置阳性对照品怎么使用？ 设置阳性对照时，GFP mRNA 根据上述表格中的 mRNA 使用量进行实验即可。 实验中离心可能出现的问题 ① 本文中出现的离心程序设置均为室温，300g，5 分钟； ② 在转染结束时，EP 管离心后没有看到细胞沉淀是正常现象，这是细胞量较少导致的； ③ 在转染结束后，可加入 1 mL 完全培养基轻吹混匀，终止转染的同时可去除转染试剂对细胞离心的影响。 （转染试剂轻微粘稠是属于正常现象） 相关链接 本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。 上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来，一直致力于为客户提供试剂，仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地，专注于体外诊断蛋白，靶标蛋白，工业用酶和细胞因子的生产和定制，按照GMP标准，为工业客户提供大包装蛋白原料。 更多产品请联系惠诚生物！ 蛋白原料网站：www.acediag.com 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 |
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