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Cat. Number
HC80202-05
Chemical Name
HC80202-05 Cas14a检测系统用荧光双标记探针(DNA荧光-淬灭双标记)
Qty 1
1OD
References

Cas14a检测系统用DNA荧光-淬灭双标记荧光探针

Cas14a核酸酶是一种内切核酸酶,其在tracrRNA:crRNA(或sgRNA)的引导下,特异结合并切割靶标ssDNA,且无需PAM位点。相比于其他的Cas蛋白,Cas14蛋白的分子量普遍较小(400-700aa);与Cas12类似,Cas14a也可以结合靶标核酸并激活其ssDNA反式切割活性,从而被应用于靶标核酸的分子检测;与Cas12不同的是,Cas14a只能结合ssDNA靶标,因此经过扩增富集的靶标核酸需使用T7核酸外切酶进行处理,且其中一条扩增引物需要使用磷硫酰化修饰以确保T7核酸外切酶仅切割其中一条链,从而留下ssDNA靶标链以用于Cas14a介导的分子检测。


Cas14a酶的附加DNA酶切功能,可以切割特定单链DNA探针(荧光和淬灭标记),使用5'端带有荧光物质(如:FAM等),3'端带有淬灭物质(如:BHQ1等)的双标记荧光探针进行荧光检测的方法。当探针完整时,5'端的荧光物质受到3'端的淬灭物质的制约,不能发出荧光。而当双标记荧光探针被分解后,5'端的荧光物质便会游离出来,发出荧光,实现核酸检测。RPA扩增的双链DNA,在crRNA的引导下Cas12a可以切割双链模板DNA和荧光标记探针,探针被水解后释放出荧光信号,通过检测荧光信号便可知道是否有DNA模板。

上海惠诚生物提供Cas12a检测系统用DNA荧光-淬灭双标记荧光探针。

cas14a.png


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