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Cat. Number
HA11729
Chemical Name
HA11729 HuicH RT EasyMix for qPCR (+ 2-step gDNA Erase-Out)
Qty 1
100rxn
Storage condition
-20℃
References

该试剂盒中5×HuicH RT EasyMix含有新一代逆转录酶HuicH Reverse Transcriptase (RTase) 和针对 逆转录反应优化的最适缓冲液,大大提高了cDNA 的合成效率,适用于两步法qRT-PCR检测。试剂盒中4 × gDNA Erase-Out Mix 可彻底去除总RNA中残留的gDNA,保证后续定量结果的可靠性,同时也简化qPCR引物设计过程,无需跨内含子设计引物。5 ×HuicH RT EasyMix 含有逆转录反应所需的所有组分,只需加入模板RNA和水即可迅速进行反应,同时含有终止4×gDNA Erase-Out Mix 反应的抑制剂,保证了cDNA的完整性。逆转录产物适用于染料法与探针法qPCR,可进行基因表达的高效分析。咨询订购热线:021-60498804

产品组成:

4×gDNA Erase-Out Mix400 μL
5×RT EasyMix400 μL
5×No RT Control Mix40 μL
RNase-free ddH2O2 × 1 mL

1. 5×RT EasyMix组分中已包含 Buffer、dNTP Mixture、RTase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo (dT) 20VN primer mix。 

2. 5×No RT Control Mix中除不含 RTase和RNase Inhibitor外,其余成分与 5×RT EasyMix 相同,用于配制No RT对照反应。

注意事项:

  1. cDNA产物可立即用于qPCR 反应,或冻存于-20℃,并可在半年内使用。如需长期存放,则建议将反转录 cDNA 产物分装后冻存于-80℃,cDNA应避免反复冻融。

  2. 用于 PCR 反应的 cDNA 产物体积建议不超过PCR反应体积的 1/10。建议使用Huich通用型 2×Q3 SYBR qPCR Master Mix (通用)进行后续的荧光定量实验,该产品具有优异的扩增性能, 能实现低浓度模板的稳定扩增;内含特殊的 ROX Passive Reference Dye,适用于所有型号的qPCR 仪器。

  3. 在 20 µL 逆转录反应体系中建议加入不超过1µg 的 total RNA。若目的基因的反转录产物量非常低,则可以最多加入5 µg total RNA。否则,如果加入RNA量过高,可能会超出后续 qPCR 的线性范围。

  4. 如果在残留gDNA去除步骤中加入的 RNA 体积过大,请确保 RNA 是溶于 Nuclease-free H2O 中,而不是于TE buffer中,因 TE buffer本身会抑制gDNA去除以及后续的逆转录反应。

  5.  由于4×gDNA Erase-Out Mix、5×RT EasyMix 及 5×No RT Control Mix 中均含有高浓度的甘油,建议使用前轻弹管壁,再简短离心以收集到管底,准确吸取。

  6. 为防止RNase污染,请保持实验区干净整洁,操作时需穿戴干净的手套、口罩,实验所用枪头、离心 管等耗材均为 RNase-free。


本产品仅作科研用途。

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