EG20117M Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal) 抗体热启动染料法荧光定量PCR预混液（通用ROX）_上海惠诚生物生物试剂,标准品,仪器设备,耗材,一站式服务

作用：催化DNA新链的合成。qPCR对酶的保真性和效率要求极高。
“热启动”特性：这是关键。在室温下，酶的活性被抗体、化学修饰或适配体等机制抑制，只有在高温（通常>90°C）初始变性步骤后才会被激活。这有效防止了在低温 setup 过程中引物非特异性退火或形成引物二聚体，大大提高了PCR的特异性和灵敏度。

dNTPs

作用：提供合成DNA新链的原料（A, T, C, G）。

缓冲液

作用：为酶提供最佳的工作环境（适宜的pH值、离子强度等）。通常含有Mg²⁺（作为聚合酶的辅因子），有时Mg²⁺的浓度是可调的。

荧光报告系统

这是qPCR Mix区分于普通PCR Mix的关键。根据检测化学原理的不同，主要分为两大类：

A. 染料法（SYBR Green法）
B. 探针法（TaqMan Probe法）

当探针完整时，由于FRET效应，报告基团发出的荧光被淬灭基团吸收。
当PCR延伸时，Taq酶的5'→3'外切酶活性会水解掉探针，使报告基团与淬灭基团分离，从而发出荧光。

成分：Mix中通常不包含探针，探针需要用户根据基因序列自行设计并额外添加。但Mix中包含了适合探针法工作的优化缓冲体系。
原理：反应中除了一对引物外，还需要一条特异性荧光探针。该探针5'端带有一个报告荧光基团（如FAM），3'端带有一个淬灭基团（如TAMRA）。
优点：特异性极高（需要引物和探针同时与模板结合），准确性好，允许多重检测（使用不同颜色的荧光基团）。
缺点：成本高，探针设计和合成复杂。

成分：SYBR Green I 染料或其他类似荧光染料。
原理：该染料可以特异性地嵌入双链DNA的小沟中，发出强荧光。在PCR过程中，每合成一条双链DNA产物，就会结合染料并发出荧光信号。荧光信号的强度与体系中双链DNA产物的量成正比。
优点：成本低，使用方便（无需设计探针），通用性强。
缺点：特异性较差，会与任何双链DNA（包括引物二聚体和非特异性产物）结合，导致假阳性。必须通过熔解曲线分析来确认产物的特异性。

稳定剂和增强剂

各厂商的专利配方，可能包括BSA、甘油、DMSO、甜菜碱等，用于提高酶的稳定性、促进复杂模板（如高GC含量）的扩增效率，并增强对PCR抑制物的耐受性。

愚公生物EG20117M Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal) 抗体热启动染料法荧光定量PCR预混液（通用ROX）产品介绍

　　Taq SYBR® Green qPCR Premix 是SYBR® Green I嵌合染料法专用qPCR试剂，为2×预混液，包含除引物和DNA样品以外的所有qPCR组分，可减少操作步骤，缩短加样时间，降低污染几率。其核心组分是经抗体修饰的热启动Taq DNA聚合酶，配合精心优化的Buffer体系以及PCR反应促进因子，使产品具有特异性强、扩增效率高等特点，有效抑制非特异性扩增，可对宽广浓度范围的模板进行准确定量，获得稳定可靠的qPCR结果。预混液中含有独特校正染料，与一系列 qPCR 设备兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料来校正仪器。

产品组成

组分	规格
Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal)	5×1 ml

储运条件

长期保存请于-20℃避光保存，Mix融解后可在4℃避光条件下稳定存放一个月，尽量避免反复冻融。

如何选择qPCR Mix

选择Mix时，需根据实验目的和预算进行权衡：

特性	染料法 (SYBR Green) Mix	探针法 Mix
特异性	较低，依赖引物特异性	极高，需特异探针
灵敏度	高	非常高
成本	低（仅需引物）	高（需引物和探针）
通量	高，适合大量基因筛选	相对较低，但可多重检测
实验设计	简单	复杂，需设计验证探针
应用场景	基因表达初步筛选、内参基因检测、熔解曲线分析	绝对定量、SNP分型、病原体检测、microRNA分析