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Cat. Number
HA11504-ZL
Chemical Name
HA11504-ZL pET28TEV-AacCas12b 质粒​ (1 μg 干粉)
Qty 1
1ug
References

pET28TEV-AacCas12b 质粒是 AacCas12b (又名 AacC2c1) 蛋白的表达质粒,用于在大肠杆菌 BL21 (DE3) 菌株中表达制备 AacCas12b 蛋白。该质粒含有乳糖操纵子诱导表达系统,可以 用 IPTG 或乳糖及其类似物诱导表达目的蛋白。


AacCas12b 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶,在靶标 DNA 存在 PAM (TTN) 的情况下,可特异地切割靶标双链 DNA。AacCas12b 蛋白比 Cas9 和 Cas12a 更小,来源 于嗜酸耐热菌且切割活性较高的 Alicyclobacillus acidoterrestris,最佳切割反应温度为 48℃。和同家族的 Cas12a 类似,识别 5' -TTN 的 PAM 序列,切割双链 DNA 产生粘性末端。AacCas12b 是双 RNA 导向,依 赖于 crRNA 和 tracrRNA (或连接后形成的 sgRNA)。此外,AacCas12b 不仅可以应用于靶标 dsDNA 的切割, 其针对 ssDNA 的反式切割活性还可用于靶标核酸的快速检测。


订购信息:

产品名称规格
推荐浓度
pET28TEV-AacCas12b 质粒1 μg 干粉20 μL, 50 ng/μL


产品组成:

pET28TEV-AacCas12b 质粒 (1 μg 干粉)。 


保存条件: 

4℃储存;≤ 4℃运输。


产品特点:

名称描述
质粒类型             大肠杆菌表达 AacCas12b 蛋白质粒
质粒大小8772 bp
蛋白大小(切除标签后) 130.6 KDa
等电点 (PI) (切除标签后)8.93
蛋白标签 6 × His Tag
标签切除蛋白酶位点 TEV 蛋白酶
启动子 T7 Promoter
复制子 pBR322 
终止子T7 terminator
表达宿主 大肠杆菌 BL21(DE3)或其它含有 T7 RNA 聚合酶的
培养条件  LB 培养基,37℃
抗性  Kan
诱导剂IPTG 或乳糖及其类似物
5' 测序引物T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物 T7-ter: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'


产品图谱:

J7{WMKLSC_XJPT76D8FW@2K.png

注意事项 

1. 转化后使用 Kan 抗性平板筛选。 

2. 除 E. coli BL21(DE3)外,该质粒还可以转入其它含有 DE3 片段或表达 T7 RNA 聚合酶的菌株,用于表 达该目的蛋白。由于该质粒带有 Kan 抗性基因,需要使用 Kan 抗性平板筛选,故宿主菌株本身不能带 有 Kan 抗性。 

3. 本产品仅供科研使用。


蛋白表达过程中相关试剂:

HA21014 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG

无水乳糖

E-005 重组TEV蛋白酶


LB培养基(1L)配置方法:

胰蛋白胨 Tryptone                                     10g

酵母浸粉 Yeast extract powder                   5g

氯化钠                                                        10g

搅拌溶解后,121℃高压灭菌半小时,无菌环境下冷却至室温,加入菌液,37℃摇床过夜培养即可


相关Crispr/cas酶:

重组CRISPR-Cas9蛋白 

重组CRISPR-Cas12a蛋白

重组CRISPR-LwaCas13a蛋白

LbuCas13a 核酸酶

AapCas12b 核酸酶

AacCas12b 核酸酶

AsCas12a(cpf1)

FnCas12a(cpf1)

AapCas12b

AacCas12b(C2c1)

CRISPR LbCas12a(cpf1)

CRISPR BbCas12a(cpf1)

CRISPR HkCas12a(cpf1)蛋白

OsCas12a(cpf1)蛋白

BoCas12a(cpf1)蛋白

TsCas12a(cpf1)蛋白

dCas9蛋白

Cas14a1核酸酶


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