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| Cat. Number | 91070/81070 |
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| Chemical Name | 奥浦迈培养基 91070/81070 液体/干粉OPM-293 CD03 全新化学成分确定HEK293细胞培养基, 用于生物制药研发及生产 |
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| Qty 1 |
1000ml |
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| Qty 2 | 10L |
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| Appearance | 红色透明液体 |
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| Storage condition | 2~8°C冷藏，干燥避光保存 |
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| References | OPM-293 CD03 是完全化学成分确定(Chemically-defined) 的培养基，不含水解物、蛋白、生长因子. L-Glutamine及任何动物来源的成分，适合于各种亚型HEK293细胞的高密度培养及高效率瞬时转染。 订购信息： 基础培养基
补料培养基
其他 293 系列培养基
应用范围 0PM-293CD03 可应用于蛋白生产和基因治疗。该培养基适用于科研和基于细胞培养的大规模生物制品的生产但不可直接用于人体或作为药物使用。 储存运输方法 储存:2~8°C冷藏，干燥避光保存 运输:常温 (液体)冷藏 (干粉) 有效期 OPM-293CD03Medium 液体:12个月OPM-293CD03DPM 干粉:24个月 液体培养基配制方法 1. 取洁净的配制容器，建议一次性配制体积不低于1L; 2. 加入最终配制体积90%的超纯水或注射用水，水温控制在25~35C; 3. 称量17.93g/L干粉培养基，缓慢加入水中搅拌10 分钟 4. 称量2.22g/L碳酸氢钠，加入水中搅拌; 5. 缓慢加入5N NaH 调节 pH到8.3~8.5，搅30 分钟，此时应完全溶解 6. 缓慢加入5N HC将pH 调回至7.0 7. 定容到最终配液体积，继续搅拌5分钟，测pH，用5N NaOH或5N HC[将H调回至7.0; 8. 取样测渗透压，加入NaCl调节渗透压至27510mOsm/kg(渗透压计算公式:NaCl添加量()配液体积(L)*(275检测值) /31.5) ; 9. 继续搅拌10 分钟，无菌过滤到合适容器，2~8”C避光保存。 干粉及液体培养基质量指标
培养条件 温度37°C，湿度80%，5~8% CO2 摇床设置: 转速110~150rpm(振幅50 mm) 细胞复苏 1. 在37°C水浴中快速(<2min) 化冷冻的细胞; 2. 将冷冻管中的细胞液全部转移到含有30mL预温过的OPM-293CD03 Medium 培养基的125mL摇瓶中 3. 放入37C，5~8% CO2，转速115~135rpm (振幅 50mm)，湿度80%的摇床中培养。 细胞传代 1. 将OPM-293 CD03 Medium培养基放入37C条件下预热 20-30mins 2. 取细胞密度》3X106-4X10cells/mL、活率》95%、处于对数生长期中期的细胞进行传代，注意:不同类型的 HEK293细胞可能具有不同的对数生长期范围。 3. 按接种密度为 0.3X10-6X 10cells/mL。 4. 无菌转移所需量的种子液至合适体积的摇瓶中，并添加所需体积的已预热的OPM-293 CD03 Medium 培养基 5. 将摇瓶放入温度37C，湿度80%，转速 110-150rpm (振幅 50mm)，5%~8%CO的细胞培养摇床中进行培养。 每2-3天用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。 细胞驯化 直接接种法 1. 对于可以直接驯化的细胞，可以从无血清培养基中直接接种到OPM-293 CD03 Medium 培养基中，接种密度参考传代步骤。 2.继续传代细胞，直到细胞稳定生长。 3. 传代几代之后，细胞密度在接种的 3-4 天内达到 3X105cells/mL、细胞活性295%。此时，可以认为细胞已被驯化成功。 梯度驯化法 1.如果直接驯化效果不佳，请尝试按照以下梯度驯化表格进行操作。 2. 选择低代次的细胞，并确保细胞处于对数期。 3. 使用原始培养基培养细胞，并继续使用原始培养基传代 2-3代，以实现稳定的细胞生长。 4. 在完全使用0PM-293CD03Medium培养基接种3-4天之后，VCD 应该稳定达到3X10cells/mL，细胞活性≥95%。此时，细胞已经驯化到OPM培养基中。
转染和瞬时表达 转染条件应根据具体情况进行优化，可能需要通过 DOE方法确定。以下转染条件仅供参考。
推荐转染流程
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