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Cat. Number

HK21294-24S

Chemical Name

HK21294-24S 还原糖含量测试盒(可见分光光度法)

Qty 1

50T/24S

References

还原糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。植物体内的还原糖主要包括葡萄糖、果糖和麦芽糖等，是最常见的单糖和双糖，其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的主要底物，也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。

测定原理：

加热促进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖生成棕红色氨基化合物，在540nm有特征吸收峰；在一定的浓度范围内，还原糖含量与540nm吸光度成线性关系，根据标准曲线，即可求出样品中还原糖的量。

需要的仪器，耗材:

1、可见分光光度计

2、台式离心机

3、可调式移液器

4、1mL石英比色皿/96孔板

5、研钵、冰和蒸馏水。

产品组成:

试剂名称	规格	保存条件
试剂R1	液体 x1瓶	2-8℃保存
试剂R2	液体 x1瓶	2-8℃保存
标准品	粉剂 x1支	2-8℃保存

实验步骤：

一、试剂准备：

标准品：10mg无水葡萄糖，临用前加入1mL蒸馏水溶解备用，2-8℃保存2周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。

二、样本处理(具体比例可以参考文献)

1.细菌或细胞的处理

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃年上清；按照细菌或细胞数量(104个)：试剂R1(mL)为500~1000:1的比例(建议1000万细菌或细胞加入2mL 试剂R1)，超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次)；转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失)，80℃水浴中40min 并且振荡8~10 次，8000g，常温离心 10min，取上清供测定用。

2. 组织的处理

按照组织质量(g)：试剂R1体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.2g组织加入2mL试剂R1)，冰浴匀浆。转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失)，80℃水浴中 40min 并且振荡 8~10 次，8000g常温离心 10min，取上清供测定用。

3. 血清(浆)的处理

按照血清(浆)体积(mL):试剂R1体积(mL)为1:5~10的比例(建议取约 0.2mL 血清(浆)加入1.8mL试剂R1)，冰浴匀浆。转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失)，80°C水浴中40min并且振荡 8~10 次，8000g，常温离心 10min，取上清供测定用。

三、测定步骤

1. 酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零

2. 标准品准备:将标准品用蒸馏水按梯度稀释，最大浓度为1mg/mL。

3. 参考标准品稀释表

序号	稀释前浓度(mg/mL)	标准液体积(uL)	蒸馏水体积(uL)	稀释后浓度(mg/mL)
1	10	100	900	1
2	1	250	750	0.25
3	1	200	800	0.2
4	1	150	850	0.15
5	1	100	900	0.1
6	1	50	950	0.05