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Cat. Number
HC-02-05-01
Chemical Name
血浆血清外泌体亲和提取试剂盒
Qty 1
1KIT
Stability
2-8℃
References


血浆血清外泌体亲和提取试剂盒


产品概述:

血浆血清外泌体亲和提取试剂盒在磁珠捕获法的基础上进行改良优化,添加了 CD9/CD81/CD63 三种磁珠可特异性捕获EVs 表面的标志性蛋白。以CD9 磁珠为例,EVlent 中的功能化磁珠可以高效地将 EVs 捕获到装配了EVs 特征蛋白CD9抗体的修饰珠上,这些磁珠对EVS 表面的 CD9 蛋白具有独特亲和性,可满足多种下游实验需求,如外泌体-细胞共培养实验、蛋白组学研究、NGS 高通量测序和 WB 检测等。


产品组分及储存条件:

名称规格储存条件
EVlent magnetic1mL4℃
Incubation Buffer I50 mLRT
Incubation Buffer II50 mLRT
Washing Buffer50 mL4℃
Elution Buffer20 mLRT

操作流程

1.血浆样本离心(2000 g、5-10 min) 取上清备用,-80℃长期保存,避免反复冻融。

2.取200 pL血浆,加入800 uL 预冷Incubation buffer l,室温混匀。

3.加入40 uL EVlent magnetic beads,室温摇匀育 2-3 h。

4.用磁力架磁吸 3 min,分离弃去上清,再加入1mLIncubation buffer ll,上下颠倒摇匀20次磁吸分离弃去上清。

5.加入1mLWashing Buffer,上下颠倒摇匀 20 次,磁吸3 min 分离弃去上清。重复该步骤2次

以下步骤需根据下游实验需求,选择相应的操作方法:


若下游为蛋白组学研究(优先推荐)

a.将步骤5得到的 beads,加入 50 uL Lysis buffer;

b.按照实验室常规的组学前处理步骤处理即可,或者选用组学前处理试剂盒进行处理快速且高效。


若下游为WB表征研究

a.将步骤5得到的 beads,加入4XLDS 上样缓冲液 (B0007,Invitrogen);b.95°C煮5 min 后,磁性分离后,吸取上清进行 PAGE 胶上样。


若下游为NTA和TEM检测

a.加入100 uLElution Buffer,涡旋震荡10 min 后,磁吸3min 收集上清。b.再次加入 100 LElution Buffer,涡旋震荡 10 min 后,磁吸3min 收集合并上清备注: 若下游为 NTA/TEM 检测则需酌情增加血浆样本量,建议 500 uL 效果更佳


注意事项和免责说明

1.磁珠静置后会沉淀,每次使用磁珠前请温和、充分的震荡,使磁珠保持均匀的悬浮状态。

2.ELUTION BUFFER 有刺激性气味,请尽量在通风橱内使用。

3.磁珠保存及使用过程中应避免冷冻、干燥和高速离心等操作,否则会破坏磁珠结构,影响蛋白结合能力。

4.血浆血清外泌体亲和提取试剂盒仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。


上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来,一直致力于为客户提供试剂,仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地,专注于体外诊断蛋白,靶标蛋白,工业用酶和细胞因子的生产和定制,按照GMP标准,为工业客户提供大包装蛋白原料。


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