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Cat. Number
HA11978
Chemical Name
HA11978蛋白预制胶 Tris-Acetate 7%, 10孔, 1.5mm(玻璃胶盒)
Qty 1
10片/盒
References

产品简介:

玻璃胶盒Tris-Acetate gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于大分子量蛋白的分离检测。

  • 采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。

  • 采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为尖锐,清晰。

  • 电泳时间短,在150V 电压下, 电泳60 分钟即可完成。

  • 有效分离40-500kDa 的大蛋白分子。

  • 胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开。

  • 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。

  • 兼容市场上主流的mini 电泳槽,如Bio-Rad, Invitrogen, 天能和君意东方等


基本信息:

胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm; 凝胶厚度:1.5mm;

凝胶尺寸为:宽×高×厚度为81×74×1.5mm; 孔数:10 孔,15 孔;

丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例:29:1; 最大上样量:60μL,30μL;

浓缩胶:4%,1.5cm; 包装:10 片/盒。

产品编号浓度孔数最大上样量
HA119787%10孔60μL
HA119797%15孔30μL
HA119803-8%10孔60μL
HA119813-8%15孔30μL


使用说明:

1.将玻璃胶盒Tris-Acetate gel 预制胶从包装袋中取出。

2.将预制胶固定在电泳槽中。内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出,用移液器吸取电泳液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的储存缓冲液。

3.上样:

3.1.变性电泳:将蛋白样品与4X SDS loading buffer 进行1:3 混合均匀,加热处理。

3.2.非变性电泳:将蛋白样品与4X Native loading buffer 进行1:3 混合均匀,加热处理。

3.3.注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

4.电泳条件:变性150 V, 60 min,非变性150V, 1.5-3h。当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

5.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开硅胶,即可打开玻璃板,取胶时,需在胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。


拆胶:

1.先沿侧边胶处简单划一刀(或先将玻璃板侧边多余封胶材料去除);

2.用刀在侧边胶处,沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料(箭头处),轻轻打开玻璃板;

3.取胶时,需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀,防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。

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产品保存和运输:

1.4℃运输。

2.4-8℃,可以存放6 个月。

3.请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。


注意事项:

1.电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果。

2.电泳结束后可以使用Tris-Glycine 转膜液进行转膜。甲醇会使大分子蛋白很容易沉淀。通过减少转膜液中的甲醇百分比(5%)来避免这种情况发生。为了进一步确保蛋白质不会沉淀,可添加SDS 至终浓度为0.1%。SDS 向蛋白添加均匀的负电荷,使得它们更容易从凝胶转移到膜上。

3.建议选择PVDF 膜。如前面所说,如果有甲醇存在,大分子蛋白很容易沉淀。而PVDF 膜不需要在转膜液中添加甲醇,目的蛋白转印的机会更高。

4.蛋白分子量>20kDa 时,建议使用0.45um 的膜。

5.湿转时120V 恒压转膜60-90 分钟。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。

6.上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。

7.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


玻璃胶盒兼容的电泳槽:

GLASS Gel 系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括

a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)

b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)

c.Life Technology Novex Mini-Cell (请与万生昊天特制挡板配合使用)

d.北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF

e.君意东方JY-SCZ2+

f.天能VE180

g.或其它胶板宽度在10 厘米的电泳槽


在Life Technology Novex 电泳槽中的应用:

由于玻璃胶盒系列预制胶比Invitrogen NuPAGE 预制胶略薄,所以需要特制的挡板,使得该系列预制胶能够适用于Life TechnologyNovex 电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知。


在Bio-Rad 电泳槽中的应用:

Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构,而玻璃胶盒系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。

a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的这面为正面,无突起的为反面。

b.将密封条旋转180 度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。

c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。

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