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Cat. Number
HA11969
Chemical Name
HA11969蛋白预制胶 Bis-Tris 8%, 10孔, 1.0mm(塑料胶盒)
Qty 1
10片/盒
References

产品简介:

塑料胶盒Bis-Tris gel 是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,MOPS buffer和MES buffer 组合使用,更好的实现中大分子量蛋白和小分子量蛋白的分离。

  • 采用镀膜塑料胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐,清晰。电泳时间短,在150V 电压下,电泳40-50 min 即可完成。

  • 胶夹打开极为轻松,塑料板可以用起翘工具撬开。

  • 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。

  • 兼容市场上主流的mini 电泳槽,如Bio-Rad, 天能和君意东方等

提供多种浓度的均一胶和梯度胶。

均一胶可选浓度:8%,10%,12%。

梯度胶可选浓度:4-12%。也可以提供特殊浓度的定制服务。

注:使用荧光上样缓冲液(Catalog #:ES008) 处理过的样品,无需剥胶,无需经过染色脱色处理,即可直接在紫外灯或者LED 灯下观察到蛋白条带。


基本信息:

胶板尺寸:宽×高×厚度为100*89*4.8mm; 凝胶厚度:1.0mm;

凝胶尺寸为:宽×高×厚度为84*74*1mm; 孔数:10 孔,15 孔;

丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例:29:1; 最大上样量:30μL,50μL

浓缩胶:4%,1.5cm; 包装:10 片/盒。


预制胶选择指导:

产品编号浓度孔数最大上样量电泳缓冲液分离范围建议电压
HA119698%10孔50μLMOPS/MES25-245kda150V
HA119708%15孔30μLMOPS/MES25-245kda150V
HA1197110%10孔50μLMOPS/MES11-180kda150V
HA1197210%15孔30μLMOPS/MES11-180kda150V
HA1197312%10孔50μLMOPS/MES11-135kda150V
HA1197412%15孔30μLMOPS/MES11-135kda150V
HA119754-12%10孔50μLMOPS/MES11-245kda150V
HA119764-12%15孔30μLMOPS/MES11-245kda150V


非变性胶(Native-PAGE)使用说明:

1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

2.将Precast Gels Plus Bis-Tris gel 预制胶从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带。

3.将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备非变性电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。

5.阴极加满电泳液,阳极的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7.上样:将非变性蛋白样品与5X 非变性loading buffer进行4:1 混合均匀。注意枪头不要戳破

凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8.电泳条件:150V, 60 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9.电泳结束,取出凝胶。用起翘器在板子侧边缘慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。

10.酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pi>7)带正电荷,需将电极插反

(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。


变性胶(SDS-PAGE)使用说明:

1.请参考分离谱图选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

2.将Precast Gels Plus Bis-Tris gel 预制胶从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带。

3.将预制胶固定在电泳槽中。

4.准备电泳缓冲液:该产品含1 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用500mL ddH2O(去离子水)进行溶解,得到500mL 10X 电泳液。取50mL 母液,加450mL ddH2O,得到500mL 1X 电泳缓冲液。

5.阴极加满电泳液,阳极的电泳液最低须加到1/3 液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。

6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

7.上样:将蛋白样品与5X 变性loading buffer(ES003)进行4:1 混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8.电泳条件:150V, 40-50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

9.电泳结束,取出凝胶。用起翘器在板子侧边缘慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。


预制胶分离图谱(变性):



产品运输和保存:

1.常温运输,常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射。

2.4-8℃保存,可以存放12 个月。

3.请勿置于0℃以下,凝胶在0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,凝胶报废。

Precast Gels Plus 兼容的电泳槽:

Precast Gels Plus 系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽,包括

a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)

b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)

c.Life Technology Novex Mini-Cell (请与特制挡板配合使用)

d.北京六一DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF

e.君意东方JY-SCZ2+

f.天能VE180或其它胶板宽度在10 厘米的电泳槽


在Bio-Rad 电泳槽中的应用:

Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的U 型密封条顶部有突起结构,而塑料胶盒系列预制胶的短玻板是凹形结构,因此该部位是平的,电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反过来安装,是平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。另有厚度约为0.5mm 的塑料垫片,请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。

a.将Bio-Rad 电泳槽中的U 型密封条(如图绿色部分) 拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的这面为正面,无突起的为反面。

b.将密封条旋转180 度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液。

c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。


注意事项:

1.Bis-tris gel 预制胶使用的是MOPS 或者MES 缓冲系统,请勿使用Tris-Gly 等其他电泳缓冲液进行电泳。

1.1.使用专门配制的MOPS 电泳缓冲液;

1.2.使用专门配制的MES 电泳缓冲液;

2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100-120V, 适当延长电泳时间。

3.电压为150V 时,1 块胶的初始电流在70mA 左右,2 块胶的初始电流在140mA 左右,随时间增加电流逐步降低。

4.如要重复使用电泳缓冲液, 建议每次更换内槽电泳缓冲液, 外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果,不建议重复使用电泳缓冲液。

5.湿转时120V 恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker 及膜上的预染marker 确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。

6.上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液。

7.如需分离<10 kDa 的蛋白,建议可以使用Cat#:HA11912尝试。如要确保电泳结果, 建议使用Cat#:HA11982,Tricine 体系预制胶。

8.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

9.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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