服务热线
021-60498804
| Cat. Number | HK21577-24S |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Chemical Name | HK21577-24S 蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒(可见分光光度法) |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Qty 1 |
50T/24S |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| References | 蔗糖不仅是重要的光合产物，也是植物体内运输的主要物质，还是碳水化合物的贮存形式之一。蔗糖磷酸合成酶（SPS）以果糖-6-磷酸为受体，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。 测定原理： 蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 二、测定步骤 1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。 2、 样本测定 在1.5mL EP管中依次加入下列试剂：
混匀，80℃水浴保温20min，冷却后，12000rpm常温离心10min。取上清液在480nm下测定各管吸光值。计算ΔA测=A测定管-A对照管，ΔA标=A标准管-A空白管。 四、SPS活力单位的计算 1、 按照蛋白浓度计算 单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。 SPS活性(U/mg prot)=（C标准管×V1×ΔA测÷ΔA标）÷(V1×Cpr)÷T 2、 按照样本质量计算 单位定义：每g组织每分钟催化产生1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。 SPS活性(U/g质量)= (C标准管×V1×△A测÷ΔA标）÷(W×V1÷V2)÷T C标准管：标准管浓度，500μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min。 注意事项： 尽量在30min内完成测定。 本试剂盒仅供科研使用! |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Copyright © 2022 上海惠诚生物科技有限公司
沪ICP备2021037845号-6
