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| Cat. Number | HK21204-48S |
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| Chemical Name | HK21204-48S 苯丙氨酸解氨酶(PAL)测试盒(紫外分光光度法) |
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| Qty 1 |
50T/48S |
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| References | 苯丙氨酸解氨酶PAL（EC4. 3 1 5）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶和限速酶，在动物体内尚未发现。与一些重要的次生物质如木质素、类黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物正常生长发育、抗病、抗逆反应中起重要作用。 测定原理： PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值，通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。 产品组成：
实验步骤： 注意：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10 分钟，取上清，置冰上待测。 二、试剂准备 1、试剂R2：临用前取1 瓶加入2.5 mL 蒸馏水充分溶解待用；现配现用，4℃可保存2 周。 三、测定步骤 1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至290nm，蒸馏水调零。 2、操作表：（在EP管中按顺序加入下列试剂）
混匀，静置10min 后，290nm 处记录测定管吸光值A1 和空白管吸光值A2，ΔA=A1-A2。（空白管只需做1-2 次） 四、PAL 活性计算 （1）按蛋白浓度计算 单位的定义：每mg 组织蛋白在每mL 反应体系中每分钟使290nm 下吸光值变化0.1 定义为一个酶活性单位。 PAL（U/mg prot）=ΔA×V 反总÷0.1÷（Cpr×V 样）÷T （2）按按样本质量计算 单位的定义：每g 组织在每mL 反应体系中分钟使290nm 下吸光值变化0.1 定义为一个酶活性单位。 PAL（U/g 质量）=ΔA×V 反总÷0.1÷（V 样÷V 提取×W）÷T V 样：加入样本体积、； V 提取：加入提取液体积； V 反总：反应总体积； T：反应时间，30min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量，g。 本试剂盒仅供科研使用! |
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