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Cat. Number
P225082
Chemical Name
奥浦迈培养基P225082 StarCHO Medium 细胞培养,用于生物制药研发及生产
Qty 1
1000ml
Storage condition
2~8℃冷藏,干燥避光保存
References

应用范围 

StarCHO 可应用于 CHO 细胞复苏、传代以及高密度流加培养。该基础培养基适用于科研和基于细胞培养的大规 模生物制品的生产,但不可直接用于人体或作为药物使用。

储存运输方法 

储存:2~8℃冷藏,干燥避光保存 

运输:常温(液体)、冷藏(干粉)

有效期

StarCHO Medium 液体:12 个月 

StarCHO DPM 干粉:24 个月

液体培养基配制方法 

  1. 取洁净的配制容器,建议一次性配制体积不低于 1L;

  2. 加入最终配制体积 90%的超纯水或注射用水,水温控制在 25~35C;

  3. 称量 20.45 g/L 干粉培养基,缓慢加入水中搅拌 10 分钟;

  4. 称量 2.22 g/L 碳酸氢钠,加入水中搅拌;

  5. 缓慢加入 5N NaOH 调节 pH 到 8.3-8.5,搅拌 30 分钟,此时应完全溶解;

  6. 缓慢加入 5N HCl 将 pH 调回至 7.0;

  7. 定容到最终配液体积,继续搅拌 5 分钟,测 pH,用 5N NaOH 或 5N HCl 将 pH 调回至 7.0;

  8. 取样测渗透压,加入 NaCl 调节渗透压至 290±15 mOsm/kg(渗透压计算公式:NaCl 添加量(g)=配液体积 (L)*(290-检测值)/31.5);

  9. 继续搅拌 10 分钟,无菌过滤到合适容器,2~8℃避光保存。

培养条件 

温度 37℃,湿度 80%,5~8%CO2 

摇床设置:转速 110-150rpm(振幅 50mm) 

细胞复苏 

  1. 在 37℃水浴中快速(<2min)融化冷冻的细胞;

  2. 将冷冻管中的细胞液全部转移到 125ml 含有 30ml 预温过的 StarCHO 培养基的摇瓶中;

  3. 放入 37℃,5~8% CO2,转速 110~130rpm(振幅 50mm),湿度 80%的摇床中培养;

  4. 细胞至少传代 2 次,待其完全复苏,细胞倍增时间(Population Doubling Time,PDT)稳定后,可按计划 进行后续操作。

细胞传代 

  1. 将 StarCHO 培养基放入 37℃条件下预热 20-30min;

  2. 取细胞密度≥1×10 6cells/ml、活率≥90%、处于对数生长期中期的细胞进行传代;

  3. 按接种密度为 0.5×10 6 ~ 1.0×10 6cells/L 的最终传代体积,计算所需种子液量;

  4. 无菌转移所需量的种子液,添加至含所需体积的已预热的 StarCHO 培养基的摇瓶中;

  5. 将摇瓶放入温度 37℃,湿度 80%,转速 110~150rpm(振幅 50mm),5%~8%CO2的细胞培养摇床中进 行培养;

  6. 每 2~3 天用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。

订购信息

    基础培养基

产品
产品号
类型
规格
StarCHO DPM
P226718
干粉
10L/50L/100L
StarCHO Medium
P225082
液体
1000mL

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