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生长曲线能给出3个测量参数：①传代培养后细胞开始增殖前的滞留期，显示细胞是否必须要适应不同的环境；②位于指数生长期中段的细胞倍增时间，显示培养基的生长促进能力；③可达到的最大细胞密度，显示是否存在某些营养成分的限制浓度。对于生长时对密度不敏感的细胞系(如连续细胞系)，最终细胞密度可显示可能的总产量，通常反映了总氨基酸和葡萄糖的浓度。记住，只能提供一半最终细胞密度的培养基生产每个细胞的费用是原来的两倍。生长曲线的测定有以下方法：每隔一段时间统计细胞数量；对生长中的细胞作图像分析；或进行色度检测。
用生长曲线测试培养基具体操作如下：
概要
接种12块12板，用5%和10%对照培养基和测试培养基培养细胞，每天收一块板，用胰蛋白酶消化细胞，收集后统计每个孔的细胞数。
材料
无菌或无菌操作
贴壁细胞培养，如A549，培养至对数期，一个75cm瓶。
粗制胰蛋白酶，0.25%，含有 10mmoI/L EDTA 10mL
生长培养基，含26mmol/L NaHCO3
250 动物烟购培养--基本技术和特殊应用指南(原书第7版)
含5%FBS的对照培养基 120mL
含10%FBS的对照培养基 200ml
含5%FBS 的测试培养基 120ml.
含10% FBS 的测试培养基 120mL
D-PBSA(用于预洗和组胞计数)500mL
12 孔板，12 个
非无菌
用于放置培养板的塑料盒或托盘
CO2温箱或用5%CO2充气的洁净盒子
操作步骤
1.胰蛋白酶消化细胞，如常规传代。
2.稀释细围悬液至2x104个/mL，每种培养基配 30mL。
3.接种 12个12孔板，每孔1mL细胞悬液:
(a)第一列的3个孔加5%FBS的对照培养基
(b)第二列的3个孔加10%FBS的对照培养基
(c)第三列的3个孔加5%FBS的测试培养基
(d)第四列的3个孔 10%FBS 的测试培养基
图 用多孔板做生长测试。
用12孔板做重复培养，每日收集细胞计数。第一列是5%血清培养基的对照组；第二列是10%血清培养基的对照组；第三列是5%血清培养基的测试组；最后一列是10%血清培养基的测试组。每天收集一块板
4.将培养板放在潮湿的CO2温箱中，或放在5%CO2充气的密封盒子中。
5.24h后，从温箱中拿出第一块板，统计每个浓度3个孔中的细胞数；
(a)彻底吸去每个孔中的培养基。
(b)每孔加入 0.5mL胰蛋白酶/EDTA
(c)将培养板温育 15min
(d)每孔加0.5mL含10%对照血清的培养基，用胰蛋白酶/EDTA/培养基将细胞吹打散
(e)用电子计数器计算悬浮液中的细胞液，按照制造商的指令操作。
注意事项：红细胞计数板也可用于统计细胞，但可能难以用于低细胞密度的情况。如果使用红细胞计数板，要将胰蛋白酶的体积减少到0.1mL，用一个没有胰蛋白酶泡沫的移液管，以胰蛋白酶溶液小心吹打细胞。将细胞加至红细胞计数器，统计规定方格中的细胞，细胞数至少要达到200个，将统计数乘以10就是每毫升的细胞数。
6.每天重复步骤 5，连续10天。
7.第3天和第6天更换培养基。
8.在第5天和第10天用Giensa(吉姆萨)染液各染一块板。
9.计算每孔的细胞数目(或每毫升的细胞数，胰酶消化重悬后的细胞计数)，将每毫升的细胞数(细胞浓度)对应培养天数作出半对数图。因为每孔是3cm，将细胞数除以3，就是每平!方厘米的细胞数(细胞密度)，也可用这个数值对应培养时间作图。
10.从曲线上可得出滞留期、倍增时间、细胞终浓度。
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